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激光鏡片熒光濾光片是熒光成像濾光片的簡稱,是應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)儀器的關(guān)鍵元件,主要作用是在生物醫(yī)學(xué)熒光檢驗(yàn)分析系統(tǒng)中分離和選擇物質(zhì)的激發(fā)光與發(fā)射熒光的特征波段光譜。通常要求濾光片截止深度在OD5以上。應(yīng)用于熒光檢測系統(tǒng)的濾光片的核心要求是高截止陡度、高透過率、高定位精度、高的截止深度以及優(yōu)良的環(huán)境穩(wěn)定性。
熒光濾光片一般包含三片組合,即激發(fā)濾光片、發(fā)射濾光片和二色鏡。
激發(fā)濾光片:在熒光顯微鏡中,只有激發(fā)熒光的波長可通過的濾光片。過去使用的是短波通濾光片,現(xiàn)在基本上都使用帶通濾光片。其外殼上刻有箭頭,指示所推薦的光的傳播方向。
發(fā)射濾光片:選擇并傳輸樣本發(fā)出的熒光,其他范圍光線截止。發(fā)射光的波長比激發(fā)光的波長要長(更加靠近紅色)??梢赃x擇帶通濾光片或者長波通濾光片作為發(fā)射濾光片。其外殼上刻有箭頭,指示所推薦的光的傳播方向。
二色鏡:又稱二向色濾光片或分色鏡。與顯微鏡的光路呈45°角放置。這片濾光片反射一種顏色光(激發(fā)光)并且透射另一種顏色光(發(fā)射光),激發(fā)光的反射率大于90%,發(fā)射光的透射率大于90%。光譜中不能透過的部分被反射而不是被吸收。濾光片在透射光和反射光下的顏色互為補(bǔ)色,因而又稱二向色濾光片。
帶寬是指通帶中透過率為峰值透過率的一半的兩個(gè)位置之間的距離,有時(shí)也叫半高寬(不叫半帶寬),英文字母經(jīng)常用FWHM(Full Width at Half Maximum)表示。具體的帶寬值定義:FWHM=λR-λL
帶寬也是有容差的,其容差范圍也帶寬本身大小有關(guān),一般來說帶寬越小,容差也跟著減小。帶寬的選擇與采用的光源、需要的信號(hào)波長范圍以及干擾的大小有關(guān)。
峰值透過率是指帶通濾光片在通帶中致高的透過率大小。峰值透過率的高低要求視使用場合不同而不同。在噪聲抑制和信號(hào)大小的要求中,如果對(duì)信號(hào)大小更關(guān)注,希望能提高信號(hào)的強(qiáng)度,這種情況下需要高的峰值透過率,如果對(duì)噪聲抑制更加關(guān)注,希望得到更高的信噪比,則可以降低一些峰值透過率的要求,而提高截止深度的要求。